Diseño de un sistema de reporte, específico, in vitro de un metabolito de interés agroindustrial, teofilina, vía ensayos con aptámeros y fluorescencia

Abstract

Los metabolitos secundarios son compuestos orgánicos sintetizados por las plantas. Estos compuestos no se encuentran relacionados directamente con el crecimiento y reproducción de las plantas; sin embargo son importantes en otros procesos biológicos y ambientales como el mecanismo de defensa contra patógenos y la interacción con otros organismos como los polinizadores. La detección de metabolitos secundarios es de interés agroindustrial en varios aspectos, por ejemplo se ha demostrado que la calidad de un producto como el cacao aumenta conforme aumenta la concentración de un metabolito secundario específico, en este caso la teobromina. Adicionalmente, la positiva correlación entre el sistema de defensa de las plantas y la concentración de metabolitos en los órganos hace que la detección de estos compuestos sea interesante para el cuidado de las plantaciones. Los sistemas de reporte que se han desarrollado para detectar compuestos, en su mayoría, están direccionados a detectar genes y proteínas de interés; no obstante no se han desarrollado métodos para el análisis a profundidad de compuestos no proteicos como los metabolitos de las plantas. Algunas técnicas desarrolladas para detección de metabolitos no permiten la observación intracelular y molecular de los mismos. Por esta razón se ha propuesto desarrollar, como una prueba de concepto, un sistema de reporte in vitro basado en ensayos con aptámeros y fluorescencia que permita detectar la teofilina, metabolito secundario que se encuentra principalmente en plantas de te y café. Mediante la experimentación se lograron cumplir los objetivos determinando la especificidad del aptámero de teofilina y la viabilidad del sistema de reporte para futuras aplicaciones in vivo.