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Título : Diseño de un sistema de reporte, específico, in vitro de un metabolito de interés agroindustrial, teofilina, vía ensayos con aptámeros y fluorescencia
Autor : Méndez, Miguel Ángel (dir)
Rivera Olloa, Paola Belén
Descriptores / Subjects : Teofilina
Aptámeros
Sistema de Reporte In Vitro
Fluorescencia
Fecha de Publicación : may-2016
Ciudad: Editorial : Quito: USFQ, 2016
Cita Sugerida : Tesis (Ingeniera en Procesos Biotecnológicos), Universidad San Francisco de Quito, Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales; Quito, Ecuador, 2016
Resumen / Abstract: Los metabolitos secundarios son compuestos orgánicos sintetizados por las plantas. Estos compuestos no se encuentran relacionados directamente con el crecimiento y reproducción de las plantas; sin embargo son importantes en otros procesos biológicos y ambientales como el mecanismo de defensa contra patógenos y la interacción con otros organismos como los polinizadores. La detección de metabolitos secundarios es de interés agroindustrial en varios aspectos, por ejemplo se ha demostrado que la calidad de un producto como el cacao aumenta conforme aumenta la concentración de un metabolito secundario específico, en este caso la teobromina. Adicionalmente, la positiva correlación entre el sistema de defensa de las plantas y la concentración de metabolitos en los órganos hace que la detección de estos compuestos sea interesante para el cuidado de las plantaciones. Los sistemas de reporte que se han desarrollado para detectar compuestos, en su mayoría, están direccionados a detectar genes y proteínas de interés; no obstante no se han desarrollado métodos para el análisis a profundidad de compuestos no proteicos como los metabolitos de las plantas. Algunas técnicas desarrolladas para detección de metabolitos no permiten la observación intracelular y molecular de los mismos. Por esta razón se ha propuesto desarrollar, como una prueba de concepto, un sistema de reporte in vitro basado en ensayos con aptámeros y fluorescencia que permita detectar la teofilina, metabolito secundario que se encuentra principalmente en plantas de te y café. Mediante la experimentación se lograron cumplir los objetivos determinando la especificidad del aptámero de teofilina y la viabilidad del sistema de reporte para futuras aplicaciones in vivo.
Descripción : Secondary metabolites are organic compounds synthesized by plants. These compounds are not related directly to the growth and reproduction of plants; however they are important in other biological and environmental processes such as defense mechanism against pathogens and interaction with other organisms such as pollinators. The detection of secondary metabolites is of agro industrial interest in various aspects; for example it has been shown that the quality of a product such as cocoa increases as the concentration of a specific secondary metabolite increases – in this case theobromine. In addition, the positive correlation between the defense system of plants and the concentration of metabolites in organs makes detection of these compounds interesting for the care of the plantations. Reporting systems have been developed to detect compounds; mostly, these are directed towards gene detection and protein detection. However, methods for analyzing in depth non-proteic compounds as plant metabolites has not been developed. Most available techniques for detection of intracellular metabolites and molecular do not allow intra cellular imaging. For this reason it is proposed as a proof of concept to develop an in vitro reporting system based on fluorescence and aptamers to detect theophyllin, a secondary metabolite found mainly in tea and coffee plants. Through the experimentation the objectives were achieved, first determining the specificity of an aptamer for theophylline and the viability of the reporting system for future in vivo applications.
URI : http://repositorio.usfq.edu.ec/handle/23000/5897
Aparece en las colecciones: Tesis - Ingeniería en Procesos Biotecnológicos

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