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Título : "Detección molecular de Bartonella bacilliformis en flebótomos (Diptera: Psychodidae) en la zona fronteriza Ecuatoriana-Peruana"
Autor : León, Renato (dir)
Carrazco Montalvo, Andrés Ricardo
Descriptores / Subjects : Dípteros
Genética
Insectos Vectores
Biotecnología
Fecha de Publicación : 2017
Ciudad: Editorial : Quito: USFQ, 2017
Cita Sugerida : Tesis (Ingeniero en Procesos Biotecnológicos), Universidad San Francisco de Quito, Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales; Quito, Ecuador, 2017
Resumen / Abstract: Los flebótomos (Diptera:Psychodidae) son los únicos vectores conocidos que transmiten la bacteria Bartonella bacilliformis que ocasiona la Enfermedad de Carrión o bartonelosis humana, enfermedad encontrada solamente en los países Andinos de Ecuador, Colombia y Perú. Se han reportado cientos de casos cada año en el norte de Perú; sin embargo, la epidemiología, distribución de la enfermedad y vectores incriminados al lado ecuatoriano es mayormente desconocida. Los reportes de los años 50´s sugieren que la enfermedad es endémica en la zona sur del país; sin embargo, contrasta con datos más recientes de pocos casos en las últimas décadas: 18 casos en la provincia de Zamora Chinchipe (zona sur del país) entre los años 1995-1996, y 39 casos entre 1995-2005. El objetivo de este estudio fue caracterizar la fauna de flebótomos de la zona, examinar su infección con Bartonella baciliformis e incriminar a posibles vectores. Para esto, se realizó monitoreo entomológico usando trampas de luz CDC, Mosquito Magnet y cebo humano protegido en las localidades de Isimanchi, Pucapamba y Maniales (provincia de Zamora Chinchipe). Se analizaron 114 individuos colectados de los cuales el 94.74% correspondia a Lutzomyia robusta, el 4.38% a Lutzomyia maranonensis y el 0.88% a Lutzomyia castanea. Se examinaron los especímenes mediante PCR y primers para las regiones conservadas de la (1) NADH deshidrogenasa subunidad gamma, (2) la secuencia intergénica 16s-23s del ARNr ITS (Internal Transcribed Spacer) y (3) Nested-PCR para la región mitocondrial del gen de la enzima Citrato Sintasa, encontrándose dos y tres muestras positivas usando los métodos (1) y (2), respectivamente; confirmando estos resultados mediante el método (3). La secuenciación reveló la presencia de ADN de Bartonella bacilliformis con el 99% de identidad mediante el método (1), y dos muestras positivas para Bartonella bacilliformis con el 93% y 99% de identidad, y una positiva para Bartonella bovis con 91% de identidad con el método (2). Este estudio reporta por primera vez, la infección de Bartonella bacilliformis en Lutzomyia robusta, aportando información para la incriminación de esta especie como vector de la enfermedad. Se reporta también la infección de Lutzomyia robusta con Bartonella bovis. Se sugieren nuevos estudios en diferentes épocas del año para estudiar estacionalidad, la posible dinámica de transmisión de la enfermedad y evidenciar casos humanos activos o subclínicos, y ampliar el estudio para explorar la infección de B.bovis en flebótomos y sus posibles implicaciones en bovinos.
Descripción : Phlebotomine sand flies (Diptera: Psychodidae) are the only known vectors of the bacteria Bartonella bacilliformis which causes Carrión Disease or human bartonelosis. The disease is only present in the Andean countries of Ecuador, Colombia and Peru. Hundreds of cases have been reported every year in northern Peru, however, the epidemiology, distribution of the disease and vectors incriminated at the Ecuadorian side are largely unknown. Reports from the 1950´s suggest that the disease is endemic in the southern región of Ecuador, nevertheless this contrasts with more recent data of very few cases reported in the last decades: 18 cases reported from the province of Zamora Chinchipe (Southern Ecuador) between 1995-1996, and 39 cases between 1995-2005. The objective of this study is to characterize the sandfly fauna of the area, examine for sand fly infection with Bartonella baciliformis and incriminate possible vectors. For this purpose, an entomological surveillance was conducted in the localities of Isimanchi, Pucapamba and Maniales (province of Zamora Chinchipe) through the use of CDC traps, the Mosquito Magnet trap and protected human bait. A total of 114 individuals were collected, of which 94.74% corresponded to Lutzomyia robusta, 4.38% to Lutzomyia maranonensis and 0.88% to Lutzomyia castanea. Specimens were examined by PCR and primers for the conserved regions of: (1) NADH dehydrogenase gamma subunit, (2) the 16s-23s intergenic sequence of the ITS rRNA (Internal Transcribed Spacer) and (3) Nested-PCR for the mitochondrial region of the Citrate Sintasa enzyme gene. Two and three positive samples were found using methods (1) and (2), respectively; results were further confirmed using method (3). Sequence analysis of the PCR products revealed the presence of Bartonella bacilliformis DNA, with 99% identity by method (1), and two positive samples for Bartonella bacilliformis with 93% and 99% identity respectively. Furthermore, one positive sample for Bartonella bovis with 91% Identity with method (2) was found. This is the first time that the infection of Bartonella bacilliformis in Lutzomyia robusta is reported, thus contributing to the incrimination of this species as a vector of the disease. The infection of Lutzomyia robusta with Bartonella bovis is reported as well. New studies are suggested at different times of the year to study seasonality, the possible transmission dynamics of the disease and evidence of active or subclinical human cases, and to expand the investigation to explore B. bovis infection in sand flies and its possible implications to cattle.
URI : http://repositorio.usfq.edu.ec/handle/23000/6480
Aparece en las colecciones: Tesis - Ingeniería en Procesos Biotecnológicos

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