Evaluación del RT-PCR ejn el diagnóstico de 6 parásitos intestinales en un área con parasitismo de baja intensidad en el Trópico,

Abstract

Antecedentes: Las parasitosis intestinales son un problema de salud pública no solo por las enfermedades que pueden producir sino por los inconvenientes que presentan los métodos diagnósticos empleados. Hasta el momento la microscopía sigue siendo la prueba estándar en algunas parasitosis, sin embargo presenta inconvenientes de sensibilidad en zonas de baja intensidad de infección parasitaria. Objetivo: En el presente estudio se evaluó al Real Time PCR (RT-PCR) para la investigación de Entamoeba histolytica, Giardia intestinalis, Ascaris lumbricoides, Strongyloides stercoralis, Necator americano y Anquilostima duodenalis en heces en un área endémica en la Provincia de Esmeraldas. Métodos: Se recolectaron muestras de heces procedentes de mujeres embarazadas a las que se realizó pruebas microscópicas en fresco, Kato-katz, concentrado formol-eter y cultivo. El ADN se extrajo de las muestras de heces utilizado FAST DNA Spin kit for soil (MP Biomedicals), en cada reacción se utilizó FastStart Taq DNA polimerasa, las secuencias fueron amplificadas en el equipo Fast Real-Time PCR 7500. Resultados: Los resultados del estudio indicaron que la prevalencia por medio de RT-PCR fueron para Etamoeba histolytica del 1,3% (25,6% por análisis en fresco + concentrado), Giardia intestinalis 5.1% (5,1% en fresco + concentrado), Ascaris lumbricoides 16% (23,3% por Kato-Katz + concentrado), Strongyloides stercoralis 4.1% (2.2% por cultivo) y uncinarias 1.7% entre los cuales 2 casos correspondían a Necator americano y 1 a Anquilostima duodenalis (2.7 % por Kato-Katz + concentrado). Cuando se comparó la sensibilidad y especificidad del RT-PCR con la microscopia se encontró para Giardia intestinalis del 25%-95.5%, Ascaris lumbricoides del 55%-94.1%, Strongolides stercoralis del 25%-96% y uncinarias del 25%-98% respectivamente. Para Entamoeba histolytica no se determinó sensibilidad y especificidad. Conclusiones: El diagnóstico de parásitos intestinales por medio RT-PCR en personas con parasitismo de baja intensidad presenta una sensibilidad reducida pero con alta especificidad con respecto a las técnicas microscópicas, estos resultados son importantes en cuanto al uso de técnicas moleculares en estudios de campo.